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韭菜中噻虫胺和灭蝇胺残留量的液相色谱一质谱联用检测方法建立

作者: 时间:2019-08-07 11:38   

摘要:建立了QuEChERS-液相色谱一质谱联用(LC-MS/MS)同时测定韭菜中噻虫胺和灭蝇胺残留量的分析方法,并采用该方法研究了这2种农药在韭菜中的消解动态及最终残留量。样品经乙腈提取,用N一丙基乙二胺(PSA)、Cls和石墨化碳(PC)净化,正离子电离,多反应监测模式,LC-MS/MS测定,外标法定量。结果表明:在0.005-1.000 mg/kg添加水平下,噻虫胺在韭菜中的平均回收率为90.0%~95.9%,相对标准偏差(RSD)为1.7%~3.3%;灭蝇胺在韭菜中的平均回收率为94.7~98.7%,RSD为0.8%~3.0%。样品中噻虫胺和灭蝇胺的定量限(LOQ)分别为0.010、0.005 mg/kg。噻虫胺和灭蝇胺在韭菜中残留量均未检出。20%噻虫胺·灭蝇胺悬浮剂按有效成分l800g/h㎡施药2次,施药间隔期为45d,安全间隔期20d,噻虫胺在韭菜中的残留量均<0.01 mg/kg,灭蝇胺在韭菜中的残留量均<0.005mg/kg。


噻虫胺(clothianidin),化学名称:1-(2一氯-5-噻唑基甲基)-3-甲基一2一硝基胍,是具有噻唑环的新烟碱类杀虫剂,主要用于水稻、蔬菜、果树及其他作物田防治蓟马、蚜虫、飞虱等半翅目、鞘翅目、双翅目和一些鳞翅目害虫。灭蝇胺(cyromazine),又名环丙氨嗪,化学名称为N-环丙基-1,3,5-三嗪一2,4,6三胺,属三嗪类昆虫生长调节剂,在动植物体内可通过脱烷基作用代谢为三聚氰胺。灭蝇胺已在许多国家获准登记作为衣药使用,在我国主要用于防治菜豆、黄瓜、韭菜等蔬菜上的美洲斑潜蝇和潜叶蝇[1,2]。噻虫胺和灭蝇胺被分别推荐用于防治韭菜韭蛆,但缺乏两者在韭菜中的最大残留限量(MRL)标准,不仅为韭菜质量安全的监管带来困难,也可能对人体健康存在潜在的风险。


关于噻虫胺和灭蝇胺在基质中残留的分析方法主要包括高效液相色谱法[3-5,11,12]和液相色谱一质谱法[6-10,13,14]。但目前尚未见采用高效液相色谱一质谱联用方法同时检测噻虫胺和灭蝇胺在韭菜上残留及消解动态并进行膳食风险评估的研究报道。


本研究拟建立韭菜中噻虫胺和灭蝇胺残留量的液相色谱一质谱联用(LC-MS/MS)检测方法,研究20%噻虫胺·灭蝇胺悬浮剂在设施栽培韭菜中的消解规律和残留量并进行初步的膳食风险评估,旨在为2种农药在韭菜上的合理使用及制定2种农药在韭菜上的最大残留限量(MRL)标准提供依据。


1材料与方法


1.1仪器及试剂


ABSciex QTRAP5500质谱仪(美国AB公司);Acquity UPLC超高效液相色谱仪(美国Wa-ters公司);色谱柱:Symmetry300 C18 4.6 mm×75mm,3.5μm;T25高速匀浆机(德国IKA公司);2K高速离心机(美国SIGMA公司);Laborota4000旋转蒸发仪(德国Heidolph公司);超声波仪(江苏昆山);涡流混合器、电子天平、精密移液枪、氮吹仪以及其它实验室常用仪器设备。


噻虫胺(clothianidin)和灭蝇胺(cyromazine)标准品:100μg/mL(农业农村部环境保护科研监测所);20%噻虫胺·灭蝇胺悬浮剂(河南金田地农化有限责任公司)。甲醇、乙腈(色谱纯,美国Thermofisher)。


1.2试验方法


按照《农药残留试验准则》[15]和《农药登记残留田间试验标准操作规程》[16],于2016年7月至11月在山东济南和______进行田间试验。山东、___韭菜品种分别为雪韭、平韭。供试药剂为20%噻虫胺·灭蝇胺悬浮剂,试验设置低剂量区、高剂量区、空白对照区,每小区面积约20㎡,重复3次。施药方法:灌根;施药适期:韭菜生长至10—15cm左右时。


1.2.1消解动态试验消解动态试验的施药时间为2016年7月19日。施药剂量为有效成分2700 g/hm2,施药1次。分别于施药后2h及1、2、3、5、7、10、14、21、30 d取样。每处理重复3次。随机在试验小区采集1kg生长正常无病害的韭菜样品,剪成1 cm以下的小段,混匀后四分法留样2009,于-20℃保存,待测。


1.2.2最终残留试验施药剂量分高、低两个剂量。低剂量为推荐剂量,有效成分1800 g/h㎡;高剂量为推荐剂量的1.5倍,即有效成分2700g/h㎡。分别施药2次和3次,每处理重复3次,施药间隔期45d。分别于最后一次施药20、30d后采样。取样方法同1.2.1。


1.3分析方法


1.3.1样品前处理称取样品20g于100mL广口瓶中,加入乙腈40mL,高速匀浆机匀浆1min,3000r/min离心5min,将上清液过滤人Agi-lent Bond Elut样品处理管(C18 50 mg,PSA 50mg,PC 8 mg,MgS04 150 mg),将有机相收集于旋转蒸发瓶,减压浓缩至近干,2.5 mL甲醇定容,过0.22μm有机滤膜,待进样检测。

韭菜中噻虫胺和灭蝇胺残留量的液相色谱一质谱联用检测方法建立

1.3.2仪器测定条件WatersSymmetry300色谱柱(Cl8 4.6 mm×75 mm,3.5μm);流动相:V(0.1%甲酸水溶液):V(甲醇)=3070;流速:0.80mL/min;柱温400C;进样体积1.0μL。正离子方式扫描;雾化气体为氢气;雾化器压力55379.2kPa。噻虫胺和灭蝇胺的测定参数见表1。在此条件下,噻虫胺和灭蝇胺的保留时间分别为1.17、1.65 min(图1)。

韭菜中噻虫胺和灭蝇胺残留量的液相色谱一质谱联用检测方法建立

1.3.3标准溶液的配制及标准曲线的绘制将100μg/mL的噻虫胺标准溶液用甲醇稀释配制0.5、0.2、0.1、0.05、0.01、0.005μg/mL的系列标准工作溶液;将100μg/mL的灭蝇胺标准溶液用甲醇稀释配制0.2、0.02、0.01、0.005、0.001、0.000 5μg/mL系列。按1.3.2的条件测定,以进样质量浓度为横坐标、对应的峰面积为纵坐标绘制标准曲线。外标法定量。


1.3.4添加回收试验在韭菜中分别添加噻虫胺和灭蝇胺标准工作溶液,添加水平分别为0.01、0.5、1.0 mg/kg,灭蝇胺为0.005、0.05、0.5、1.0mg/kg,每个水平重复5次,按本研究建立的方法进行样品前处理和测定,分别计算平均添加回收率和相对标准偏差。


1.4农药残留膳食摄入风险评估


膳食摄人评估是在毒理学和残留化学评估的基础上,对居民因膳食摄人带来的农药残留对人体健康造成的风险进行定量评价,为提出农药最大残留限量建议值提供依据。本研究中膳食的来源包括韭菜、已登记作物及食品中农药最大残留限量标准(GB 2763-2016)[17]中有残留限量值的作物。


2结果与分析


2.1方法的线性范围及检出限


噻虫胺在0.005~0.5 mg/L和灭蝇胺在0.0005—0.2 mg/L范围内,质量浓度与对应的峰面积间线性关系良好。经最小二乘法拟合得标准曲线,噻虫胺回归方程为Y=2×106X一3241.4(R=0.995),灭蝇胺回归方程为Y=2×107X一12604(R=0.995)。典型色谱图见图2。

韭菜中噻虫胺和灭蝇胺残留量的液相色谱一质谱联用检测方法建立

2.2方法的准确度及精密度


添加回收试验结果表明:在0.01、0.5、1.0 mg/kg 3个添加水平下,基质为韭菜时,噻虫胺平均回收率为90.0%~95.9%,相对标准偏差(RSD)为1.7%~3.3%;在0.005,0.05、0.5、1.0 mg/kg 4个添加水平下,基质为韭菜时,灭蝇胺平均回收率为94.7-98.7%,RSD为0.8%~3.0%。根据标准曲线最低档浓度和进样体积,计算得到灭蝇胺和噻虫胺的检出限(LOD)均为0.5 ng;根据添加回收最低档添加浓度,噻虫胺和灭蝇胺在韭菜中的定量限(LOQ)分别为0.01mg/kg和0.005mg/kg。


2.3噻虫胺和灭蝇胺在韭菜上的消解动态


噻虫胺和灭蝇胺在韭菜中残留量均未检出,故无法计算农药消解半衰期。这可能与施药方式有关,由于施药方式是灌根,药剂并未立即被韭菜植株吸收,而采样是韭菜植株,所以韭菜中均没有检出农药残留。


2.4噻虫胺和灭蝇胺在韭菜上的最终残留量


20%噻虫胺·灭蝇胺悬浮剂以高、低2个剂量施药2~3次,施药间隔期为45d,距末次施药后20d和30d采样测定,韭菜中噻虫胺和灭蝇胺的残留量均为未检出。


2.5膳食摄入风险评估结果


根据噻虫胺日允许摄人量(ADI)0.1 mg/kgbw及中国人平均体重63 kg[18,19],计算得到中国成人的日允许摄人量为6.3mg。依据食品中农药最大残留限量标准(GB 2763-2016)中膳食风险评估要求,通过已有的残留限量标准、试验中得到的20d所对应的规范残留试验中值(STMR)以及中国成人的日允许摄人量,计算得出膳食风险概率为5.63%。结合中国农药登记情况和居民人均膳食结构,计算得到普通人群噻虫胺的理论最大日摄人量(TMDI)为0.35 mg,占ADI的5.63%,表明通常不会对一般人群健康发生不可接受的风险。


根据灭蝇胺日允许摄人量(ADI)0.06 mg/kgbw及中国人平均体重63 kg[19],计算得到中国成人的日允许摄人量为3.78 mg。依据食品中农药最大残留限量标准(GB 2763-2016)中膳食风险评估要求,通过试验中得到的20 d所对应的STMR(0.005 mg/kg)以及中国成人的日允许摄人量,计算得出膳食风险概率为3.86%。结合中国农药登记情况和居民人均膳食结构,计算得到普通人群灭蝇胺的理论最大日摄人量(TMDI)是0.15mg,占ADI的3.86%,表明不会对一般人群健康发生不可接受的风险。


3结论


建立了基于QuEChERS-LC-MS/MS同时测定韭菜中噻虫胺和灭蝇胺残留量的分析方法。在0.005~1.0 mg/kg范围内,噻虫胺和灭蝇胺在韭菜中的平均添加回收率为90.0%~98.7%、RSD为0.8%~3.3%。利用建立的残留分析方法,进行动态消解试验结果表明,噻虫胺和灭蝇胺在韭菜中的残留量均未检出。


噻虫胺和灭蝇胺在韭菜上均未获得登记。拟推荐20%噻虫胺·灭蝇胺悬浮剂按有效成分1800 g/h㎡施药2次,施药间隔期为45d,安全间隔期20d。噻虫胺在韭菜中的残留量均<0.01mg/kg,灭蝇胺在韭菜中的残留量均<0.005mg/kg。在此基础上,结合膳食摄人结构模型分析,对噻虫胺和灭蝇胺的膳食风险进行初步评估,其风险概率<1,分别为5.63%和3.86%。表明栽培韭菜,按照推荐剂量和施药次数,施用20%噻虫胺·灭蝇胺悬浮剂,通常不会对一般人群健康产生不可接受的风险。目前,中国尚未制定噻虫胺和灭蝇胺在韭菜中的最大残留限量值(MRL),本研究结果为制定噻虫胺和灭蝇胺在韭菜中的MRL值提供了数据支撑。


参考文献:


[1]张明媚,孙克,吴鸿飞,等.噻虫胺的合成[J].农药,2010,49(2):94-96.


[2]王忠燕,苑士涛,李梦瑶,等.20%灭蝇胺·噻虫胺悬浮剂不同剂量防治韭菜迟眼蕈蚊幼虫的田间药效试验[J].农药,2017,56(1):76-78.


[3]侯如燕,蔡荟梅,张正竹,等.液相色谱法检测水果蔬菜中的烟碱类农药残留[J].分析试验室,2010,29(2):59-63.


[4]杨庆喜,刘娜,程功,等.噻虫胺在水稻和土壤中的残留及消解动态[J].农药,2018,57(5):343-346,358.


[5]李广领,谷珊山,刘博,等.基质分散萃取一高效液相色谱法对菠菜中噻虫胺残留的检测[J].湖北农业科学,2016,55(2):465-468.


[6]张鹏,金芬,杨莉莉,等.噻虫胺在番茄和土壤中的残留及消解动态[J].农药学学报,2016,18(4):490-496.


[7]刘艳萍,王思威,孙海滨,等.噻虫嗪及其代谢物噻虫胺在节瓜中的消解动态及初步膳食风险评估[J].农药学学报,2018,20(2):211-216.


[8]张春荣,何红梅,徐玲英,等.噻虫胺在水稻中的残留分析方法及其消解动态[J].浙江农业学报,2014,26(5):1263-1267。


[9]徐军,张盈,董丰收,等.超高效液相色谱一串联质谱法快速检测菜豆及土壤中的灭蝇胺残留[J].农药学学报,2012,14(6):654-658.


[10]樊苑牧,俞雪钧,顾晓俊,等.高效液相色谱法测定含脂羊毛中灭蝇胺和环虫腈[J].分析化学,2010,38(1):113-116.


[11]郭筠,莫汉宏,安凤春,等.HPLC法检测灭蝇胺在黄瓜和土壤中的残留[J].环境化学,2004,23(6):700-703.


[12]王冉,刘铁铮,柳伟荣.SPE-HPLC法测定鸡蛋中灭蝇胺一环丙氨嗪[J].浙江农业学报,2005,17(6):376-379.


[13]钱鸣蓉,章虎,何红梅,等.亲水作用色谱一串联质谱测定蔬菜中灭蝇胺及其代谢物三聚氰胺[J].分析化学,2009,37(6):902-906.


[14]王京文,周航,卜惠斐,等.灭蝇胺及其代谢物三聚氰胺在大棚黄瓜上的残留降解动态[J].农药,2011,50(2):130-140.


[15]NY/T 7882004,农药残留试验准则[s].北京:中国农业出版社,2004.


[16]农业部农药检定所.农药登记残留田间试验标准操作规程[M].北京:中国标准出版社,2007:143-147,320-324.


[17]GB 27632016,食品安全国家标准食品中农药晟大残留限量[s].北京:中国标准出版社,2017.


[18]中国农药信息网.农药登记信息[EB/OL].http://www.chinapesticide.gov.cn/2017-11-20.


[19]_______卫生部,_______科学技术部,_______国家统计局.中国居民营养与健康状况2002[M].北京:人民卫生出版社,2005.

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